2026.04.29

C.WASH 非接触式微孔板样品处理系统，依托离心力实现微孔板内液体的高效去除，并自动完成清洗液与缓冲液的加注，一站式实现高通量、全自动、高重复性的整板清洗流程。

为系统评估 C.WASH 的清洗性能，本研究在不同离心转速条件下，分别测试其对 96 孔板和 384 孔板的清洗效率。清洗效率以系统去除培养基、清洗缓冲液及未结合化合物的能力为核心衡量指标 —— 残留体积越低，越能有效降低背景信号，保障检测结果的可靠性。

实验采用荧光素溶液填充微孔板，通过对比清洗前后的荧光信号强度，定量计算清洗效率。其中，单次完整清洗循环定义为“离心甩干板内液体 → 自动加注清洗液”，这两步操作均由 C.WASH 全自动独立完成，全程无需人工干预。

图 1. 采用 C.WASH 系统离心除液与非接触式加注测定清洗效率的工作流程

材料与方法

1. 材料

荧光素：100 μmol/L，溶于水（CAS 号：518-47-8）

黑色实心微孔板：96 孔板及 384 孔板（4titude 品牌，货号 4ti-0263 / 4ti-0264；Brooks Life Sciences）

2. 清洗效率测定

实验分为不同转速组别，每组选用1块96孔板或1块384孔板，向每孔加入对应体积的100 μM 荧光素溶液（384孔板每孔50 μL，96孔板每孔100 μL），确保孔内液体均匀分布。

启动 C.WASH ，先进行5秒离心甩干以去除孔内液体，随后由设备自动加注同体积水，完成1个清洗循环；重复上述操作完成第2个清洗循环。分别测定清洗前、1个清洗循环后、2个清洗循环后的荧光信号强度，用于计算清洗效率。清洗效率 = (1 – 清洗后荧光信号强度 / 清洗前荧光信号强度) × 100%。

3. 残留体积定量

采用 I.DOT 微量分液仪制作残留体积定量标准曲线，分液体积范围为10 nL–300 nL，设置体积梯度，每组实验设置3个复孔，以保证数据的可靠性。

标准曲线制作完成后，用 C.WASH 系统向所有实验孔（96孔板每孔100 μL、384孔板每孔50 μL）加注水，根据标准曲线计算实验中荧光素的残留量。

4. 荧光检测

所有荧光信号检测均采用 Tecan Spark 多功能微孔板检测仪，采用顶部荧光读数模式。

图 2. 基于荧光信号的残留体积定量标准曲线（n=3，n为孔数）

结果与讨论

1. 清洗效率

不同转速条件下，96孔板与384孔板的清洗效率分别如图 3A、图 3B 所示。实验结果表明，即使在低转速（22×g）条件下，经过1个清洗循环，也可去除微孔板内99.5%以上的荧光信号；随着转速的升高，清洗效率进一步提升，荧光信号去除率略有增加。

经过2个清洗循环后，无论采用何种转速，均可实现99.99%以上的荧光信号去除，达到近乎完全清洗的效果。这一结果表明，使用 C.WASH 可将传统洗板步骤缩减至2次，有效简化实验流程，缩短实验周期，提升实验效率。

图 3A. 96 孔板在不同转速下1个/2个清洗循环的清洗效率（均值，n=96，n为孔数）

图 3B. 384 孔板在不同转速下1个/2个清洗循环的清洗效率（均值，n=96，n为孔数）

2. 除液后残留体积

单次离心除液后，微孔板内的残留体积如图 4 所示。实验结果显示，在所有测试转速条件下，96孔板与384孔板的残留体积均低于1 μL；其中，384孔板的残留体积更低，均低于250 nL。

在最高转速条件下，两种微孔板的残留体积可低至50 nL，相比传统洗板机或手动拍板方式，残留体积减少90%以上。更低的残留体积能够显著降低各类板基实验的背景信号，减少干扰因素，有效提升实验数据的稳定性与准确性，为后续实验结果的可靠性提供保障。

图 4. 96 孔板（绿色）与 384 孔板（蓝色）在不同转速下离心后的残留体积（均值，n=96，n为孔数）

实验结论

1. C.WASH 系统仅需 1 个清洗循环，即可实现超过 99.5% 的清洗效率，能够满足多数实验的清洗需求；

2. 经过 2 个清洗循环，荧光信号去除率可达 99.99% 以上，有助于保障清洗效果；

3. 设备采用全自动操作模式，可减少人工操作带来的误差，有利于获得可重复的实验结果；

4. 与传统洗板系统相比，C.WASH 系统可减少清洗循环次数，从而缩短实验时间并降低试剂消耗，具有省时、省试剂、操作简便的优点，适用于各类微孔板相关实验场景。