2022.12.09

【新产品发布】Gyros 公司开发出生物标志物免疫测定方案：人类细胞因子检测试剂盒

药物开发过程的许多阶段，从了解疾病和途径，到识别疾病的早期诊断标志物，找到新的药物靶点，以及改进临床试验的设计，蛋白质生物标志物在其中都有着重要意义。因此，在实现生物标志物定量并支持临床前和临床生物治疗的发展的进程中，更需要灵敏、准确和稳健的生物标志物免疫测定方法以满足合适用途。

Gyros发布生物标志物免疫测定方案

细胞因子，包括白细胞介素、干扰素、肿瘤坏死因子和趋化因子，具有多种促炎和抗炎作用，对健康和疾病状态非常重要。

2022年12月，Gyros Protein Technologies公司新发布的人类细胞因子检测试剂盒（Gyrolab Human Cytokine Kit），这是该公司生物标志物免疫测定方案的第一个产品，包括用于定量人类炎症细胞因子的五种单分析物生物标志物免疫测定方案试剂：人类TNF-a、IFN-γ、IL-6、IL-10和IL-4，能满足可靠测量人类血清样本中细胞因子生物标志物的需要，并应对药物开发计划和监管研究期间遇到的生物标志物测定开发挑战。

图1. Gyrolab Human Cytokine Kit

Gyrolab Human Cytokine Kit 包含：Gyrolab Human IL-4 Kit Reagents、Gyrolab Human IL-6Kit Reagents、Gyrolab Human IL-10 Kit Reagents、Gyrolab® Human IFN-gamma Kit Reagents、Gyrolab® Human IFN-gamma Kit Reagents。

技术特点（Gyrolab Human Cytokine Kit）

Gyrolab Human Cytokine Kit包含即用试剂，包括一次CD运行的标准材料和缓冲液（96个数据点）。试剂盒试剂经过优化，可与Gyrolab® Bioaffy™ 4000 CD结合使用，也可以根据需求与其他类型Gyrolab CD使用。并且，试剂盒试剂无需进行分析开发，大大缩短了项目周转时间：

速度快：90min内自动生成96个数据点，无需人工干预。
灵敏度高：pg/mL级别的高灵敏度。
动态范围广泛：2-3log，广泛的动态范围更大限度地减少了所需的稀释，从而简化了回收率和稀释线性实验，减少了误差导致的可变性，加快了工作流程。
数据稳定：数据的稳健性和再现性使其能够顺利转移到其他实验室、站点或合作研究机构，并便于对法规提交进行验证。
使用简便：即插即用产品，无需进行分析开发，提供方便快捷的分析解决方案。

检测原理（Gyrolab Human Cytokine Kit）

图2.Gyrolab Bioafy CD上的夹心免疫测定法

Gyrolab人类细胞因子检测试剂盒试剂可以使用Gyrolab CD的夹心免疫测定来定量细胞因子：生物素化的抗细胞因子抗体被自动引入Gyrolab Bioafy CD的微结构中，并在流通亲和柱中捕获在链霉亲和素涂层珠上，将含有细胞因子的样品引入微结构中并由固定化的抗细胞因子抗体捕获，然后使用Alexa Fluor®647标志的抗细胞因子抗体检测结合的细胞因子。最后，结果使用Gyrolab Evaluator进行评估或输出到LIMS。所有Gyrolab软件程序都是为符合21 CFR part 11-compliance而设计的，确保可以在规定的环境中开发和转移测定。

分析数据（Gyrolab Human Cytokine Kit）

Gyrolab人类细胞因子检测试剂盒试剂能够通过具有良好特征的试剂盒试剂和标准品生成高质量数据，同时提供高灵敏度和宽动态范围，以涵盖疾病状态或药效学研究中所见的细胞因子水平的全谱。下面以Gyrolab Human IL-4 Kit Reagents举例展示。

1.灵敏度和测定范围

图3.Gyrolab人IL-4试剂盒试剂标准曲线（每个QC样品分析一式三份）

两名操作员在两天内对QC样品进行了六次试验，以确定试剂盒定量下限（LLOQ）和定量上限（ULOQ）。

2.精度和准确性

图4.Gyrolab人IL-4试剂盒试剂的测定范围

两名操作员在两天内对四份QC样品进行了六次试验，分析了不同浓度的重组人细胞因子，测定了批内和批间精密度。

3.稀释线性和回收率

图5.加入重组IL-4的血清样本的稀释线性和回收率
将重组人细胞因子加入具有低内源性水平的人和食蟹猴（不适用于IL-10）的三份血清样品中。对未加和加入重组细胞因子的样品进行分析，分析纯（未稀释）样品并在生物标志物样品稀释缓冲液1中稀释。从反向计算的浓度中减去内源性水平，将回收率与加标溶液的测量浓度进行比较。

4.相似性

图6.细胞上清液中内源性IL-4的相似性

使用来自受刺激的人外周血单个核细胞（PBMC）的细胞上清液来研究内源性细胞因子的平行性。用植物血凝素（PHA）或脂多糖（LPS）刺激细胞分泌细胞因子。用生物标志物样品稀释缓冲液1稀释上清液。将内源性细胞因子的平行性与标准曲线中使用的重组细胞因子进行比较。

随着生物标志物在生物治疗开发中的应用不断增加，对具有高重现性的单分析物分析的需求也越来越高。迄今为止，客户一直在使用开放的Gyrolab平台开发生物标志物分析。新的即插即用试剂盒细胞因子试剂盒（Gyrolab Human Cytokine Kit）的推出，通过取消化验开发所需的时间线，提高了平台的实用性，并提供了一系列优势满足您的需求。

Gyros Protein Technologies公司生物制药开发部负责人Mark Vossenaar先生这样评价：“生物标志物检测的开发需要大量的时间和资源，需要高水平的专业知识，而且往往需要高昂的成本。这就是为什么商业免疫分析试剂盒越来越受欢迎的原因。作为生物标志物试剂盒系列中的第一个产品，本次推出了五种新的Gyrolab人类细胞因子检测试剂盒，这表明我们致力于利用公司经验证的专业知识来实施创新技术使科学家能够快速生成用于药物安全性和疗效关键决策的高质量生物标志物数据。”

如果您想了解更多，欢迎联系我们。